细胞培养要注意 准备工作需做好
762 人阅读发布时间:2023-02-22 11:22
细胞培养已经发展成了一项多元化技术,各种培养技术如雨后春笋般出现,并被广泛应用于基础研究、诊断、医学、生物技术等领域。在细胞培养过程中,最基础最重要的还是无菌技术,我们将从以下2个方面与大家分享细胞培养要注意的一些无菌技术。
一、无菌环境
1、层流柜:这些年来,由于层流柜、过滤空调机的引入,已经为细胞培养创造出了更简单、更可靠的无菌环境,在层流柜内工作的主要优点是:可提供持续、稳定的过滤气流通过工作台面,避免工作空间受到灰尘污染。
在使用层流柜进行细胞培养时,要定期对过滤器进行维护检查,一般情况下,每3-6个月检查一次初效过滤器,每6个月检查一次高效过滤器。初效过滤器可以在关掉风机后,拆卸清洗或者更换新的初效过滤器;高效过滤器要对气流情况和孔数进行周期性的监测,若高效过滤器需要更换,最好由专业的工程师来完成。
2、操作台:作为细胞培养实验的主要“战场”,必须保持干净整洁。每次实验前要用70%乙醇充分擦洗工作台面,移入操作台的每个物品,均要用70%乙醇进行擦拭消毒;实验中若有溢出物,应立即擦去,并用70%乙醇擦拭该区域;实验后,移除所有物品并再次擦洗操作台。还要定期打扫操作台下方空间,建议每周至少一次。
3、其他:操作细胞培养物,要注重个人卫生,穿戴个人防护设备,既可保护操作者不受培养物带来的伤害,也可保护培养物免受操作者带来的污染。无尘服可以降低皮屑及衣服上污物和灰尘污染培养物的可能。手套可以降低接触敏感性,为操作者提供保护,并且比裸露的皮肤更容易保持清洁,在接触和使用共用设备时,手套的无菌性会大大降低,所以要经常用70%乙醇擦拭。
二、无菌操作
1、在细胞实验开始前,用70%乙醇擦拭工作台表面和将要放入工作台的所有物品,擦拭时,有时会擦掉物品表面的标记,所以要使用抗乙醇的记号笔。
2、切勿碰触吸管尖头部位以及容器瓶口,不要在开口容器的正上方进行实验。容器打开后,将瓶身倾斜约45°角取用,尽量不要把瓶盖盖口朝上放置在工作台面上,避免瓶盖被污染。
3、每次操作只处理一株细胞株,避免不同细胞株之间出现交叉污染。
4、不可直接将液体从一个无菌容器中倒入另一个无菌容器,因为在倒液过程中,会在试剂瓶内外两侧之间形成一个液体桥,有可能会使污染物进入试剂瓶内。
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